Paraformaldehüüd väidetav alt plasmamembraani läbilaskvaks teeb paljudel juhtudel mingil määral – kuna tuumaümbrise membraanil on erinev keemiline koostis (peamiselt kolesterooli osas), siis ma ei teeks seda oletame, et nii.
Kas fikseerimine kahandab rakke?
Aukude ümber olevad fikseeritud valgud hoiavad raami stabiilsena. Igasugune fiksatsioon võib aga kaasa tuua väga väikese kahanemise teie rakkudes, mida te ei pruugi märgata.
Mida kasutatakse rakkude permeabiliseerimiseks?
Permeabiliseerimine viiakse sisse pärast seda, kui rakud on valmistatud valkude ristsidumise algatamiseks fikseeriva ainega, nagu formaldehüüd või etanool. … Kaks kõige levinumat vahendit, mida rakumembraani läbilaskmiseks kasutatakse, on pesuvahendid Triton-X 100 või Tween-20, kusjuures Tween-20 on neist kahest õrnem.
Mida paraformaldehüüd rakkudega tegi?
PFA põhjustab kovalentseid ristsidemeid molekulide vahel, liimides need tõhus alt kokku lahustumatuks võrguks, mis muudab rakupinna mehaanilisi omadusi. Varasemad uuringud näitavad, et rakupind kõveneb pärast fikseerivat töötlemist [7–10].
Kuidas rakku läbistada?
Rakkude läbilaskvus läbi metanooli või atsetooni fikseerimise või pesuaine kasutamisega võimaldab antikehadel rakku läbidamembraani ja siseneda rakku. Rakkude läbilaskvuse suurendamiseks kasutatav kõige levinum reagent on mitteioonne detergent Triton X-100.
