Lutsiferiin on tavaline bioluminestseeruv reporter, mida kasutatakse lutsiferaasi ekspressiooni in vitro pildistamiseks. See Firefly lutsiferaasi ensüümi vees lahustuv substraat (tavaliselt pärineb Photinus pyralisest) kasutab kaasfaktoritena ATP-d ja Mg2+, et eraldada hapniku juuresolekul iseloomulik kollakasroheline emissioon.
Mida D-Luciferin teeb?
Lutsiferiin on tavaline bioluminestseeruv reporter, mida kasutatakse lutsiferaasi ekspressiooni in vivo pildistamiseks . See tulekärbse lutsiferaasi ensüümi vees lahustuv substraat kasutab kofaktoritena ATP-d ja Mg2+, et tekitada hapniku juuresolekul iseloomulikku kollakasrohelist emissiooni., mis nihkub in vivo temperatuuril 37 °C punasele tulele.
Mis on D-lutsiferiini kaalium?
Üksikasjad. D-Lutsiferiini kaaliumisool on kasulik substraat ensüümile Firefly Luciferase. Oksüdeerimisel ensüümi lutsiferaas tekitab bioluminestsentsi. D-lutsiferiini saab kasutada huvipakkuva promootoriga seotud lutsiferaasi geeni ekspressiooni testimiseks.
Kuidas teete D-Luciferini?
1. Valmistage 200X lutsiferiini põhilahus (30 mg/ml) steriilses vees. Segage ettevaatlikult ümber pöörates, kuni lutsiferiin on täielikult lahustunud. Kasutage kohe ära või jagage alikvootideks ja külmutage edaspidiseks kasutamiseks temperatuuril -20 °C.
Kuidas te lutsiferiini süstite?
(Luciferini manustatakse tavaliselt kas intraperitoneaalselt või intravenoosselt.) Näide: süstige 10 µLLutsiferiini põhilahus ühe grammi kehamassi kohta (tavaliselt ~200 µL 20 g hiire jaoks standardse 150 mg/kg süsti jaoks). 5. Oodake 10–20 minutit enne pildistamist, et saavutada maksimaalne lutsiferaasi signaali platoo.