Kontrollantikehade laadimine on olulised kontrollid, kuna need näitavad proovide võrdset laadimist kõikidesse süvenditesse. Laadimiskontrollid näitavad ka valkude õiget ülekandmist membraanile Western blot'i protsessi käigus. Laadimiskontrollid on tavaliselt kõrge ja üldlevinud ekspressiooniga valgud.
Mida laadimise juhtseade teeb?
Laadimiskontroll on valk, mida kasutatakse kontrollina Western blot katses. … Neid kasutatakse tagamaks, et valk on kõikidesse süvenditesse võrdselt laetud.
Miks me kasutame Western blotis laadimise juhtelementi?
Laadimisjuhtelementidel on Western blot'i kontrollimisel teine roll. Neid saab kasutada et kontrollida, kas geelilt on kogu geeli ulatuses ühtlane ülekandumine membraanile. See on hädavajalik, kui võrreldakse proovide valgu ekspressioonitasemeid.
Kuidas kasutada laadimisjuhtelementi Western blotis?
Laadimisjuhtimisseadmete signaale kasutatakse tavaliselt huvipakkuvate valkude signaalide normaliseerimiseks. Laadimiskontrolli kasutamiseks nendel eesmärkidel tuleks kontrollvalgu antikehade ja eksperimentaalse antikehaga tuvastamine teha samal blotil. Laadimiskontrollina kasutatakse mitmesuguseid erinevaid valke.
Miks kasutatakse aktiini laadimiskontrollina?
Beeta-aktiini kasutatakse tavaliselt Western Bloti laadimiskontrollinatuvastatud valgutaseme normaliseerimiseks, kinnitades, et valgusisaldus on kogu geelis ühesugune.