Kuna heliga töötlemine võib potentsiaalselt lagundada valke ja denatureerida valguepitoope, hindasime järgmisena ultrahelitöötluse mõju valgu terviklikkusele.
Kas ultrahelitöötlus võib valke kahjustada?
Populaarsed vastused (1)
Standardne ultrahelitöötlusprotokoll pigem ei saa põhjustada valkude killustumist- energiat on liiga vähe. See ei tohiks isegi põhjustada selle denaturatsiooni. Liiga kaua ultraheliga töötlemisel ja proovi ülekuumenemisel võib see denatureerida. Kui kasutate nikli kromatograafiat, võivad muud ribad olla lihts alt lisandid.
Kas ultrahelitöötlus võib katkestada peptiidsidemed?
Sonication ei saa tavaliselt lõhkudavalgu esmast struktuuri, kuna see struktuur (aminohappejärjestus) koosneb kovalentsetest sidemetest, mis on mitu korda tugevamad kui vesiniksidemed ja ultraheliga töötlemine. pakkuda nende sidemete katkestamiseks vajalikku energiat.
Kas ultrahelitöötlus purustab tuumamembraani?
A Lühike madala energiaga ultrahelitöötlus võib häirida plasmamembraani, ilma et see lõhuks liiga palju mitokondriaalseid või tuumamembraane, andes tulemuseks taktitundelised mitokondrid.
Kas valkude ekstraheerimiseks on vajalik ultrahelitöötlus?
Pesuaine lahustamine (nt SDS), mis on vajalik membraanivalkude eraldamiseks, annab peamiselt nukleiinhapete tõttu liimilaadse lüsaadi. Seetõttu on sellistel juhtudel nende nukleiinhapete lõhustamiseks vajalik ultrahelitöötlus. Ultrahelitöötlus genereerib palju soojust ja ei ole heapalju valke.
