pBR322 on 4361 aluspaari pikkune ja sellel on kaks antibiootikumiresistentsuse geeni – ampitsilliiniresistentsust kodeeriv geen bla (AmpR) ja geen tetA, mis kodeerib tetratsükliiniresistentsuse (TetR) valku.
Millises pBR322 kohas asub tetratsükliiniresistentne geen?
- BamH 1 restriktsiooniensüümi sait on tetratsükliiniresistentsuse geenil.
Millist restriktsiooniensüümi kasutaksite tetratsükliiniresistentsuse geeni lõikamiseks pBR322-st?
pBR322 sisaldab geene tetratsükliini ja ampitsilliini resistentsuse ensüümide jaoks, samuti kohti, kus seda saab lõigata spetsiifiliste restriktsiooniendonukleaaside ja sisestatud sobivate DNA järjestustega.
Milline järgmistest restriktsiooniendonukleaasidest lõikab pBR322 plasmiidi TetR tetratsükliiniresistentsuse geenis?
Restriktsiooniensüümi BamHI tuleks kasutada, kuna selle ensüümi restriktsioonisait asub tetratsükliiniresistentsust kodeerivas geenis.
Miks on E. coli tetratsükliini suhtes resistentne?
coli (4, 7), mis viitab sellele, et resistentsus on valitud kõrvalseisja mõju tõttu kommensaalsele E. coli-le teiste patogeenide ravimisel inimestel või loomadel. Bakterite resistentsust tetratsükliini suhtes vahendab kõige sagedamini tetratsükliini energiast sõltuv väljapumpamine bakterirakust.