Inkubeerige anumat toatemperatuuril 2–3 minutit . Tugev alt kleepuvad rakud saab kiiresti eemaldada temperatuuril 37 °C. Jälgige rakke mikroskoobi all. Eraldunud rakud näivad mikroskoobi all ümarad ja murduvad.
Mis juhtub, kui trüpsineerite rakke liiga kaua?
Liiga kõrge trüpsiinikontsentratsiooniga rakkude inkubeerimine liiga pika aja jooksul kahjustab rakumembraane ja tapab rakud. Kui te pole kindel kasutatava trüpsiini kontsentratsioonis, kasutage madalat kontsentratsiooni.
Kuidas rakke trüpsineerida?
Rakke saab resuspendeerida, rakususpensiooni õrn alt pipeteerides, et tükke purustada. Vajadusel võib rakkude loenduse ja/või subkultuuri jaoks täiendav alt lahjendada.
Kui kaua kulub rakkude kinnitumiseks?
esimesed rakud kinnituvad juba pärast 3-5 min! Minu kogemuse järgi kinnitati enamik EC-sid 10-20 minuti pärast. Kuid mida kauem ootate, seda kindlam on kiindumus.
Kas on halb rakkude trüpsiniseerimine kaks päeva järjest?
Jah, see on kahjulik, kui te oma rakke pidev alt trüpsiniseerite pärast 24-tunnist lõhenemist. Soovitav on lõhestada pärast 48-tunnist lõhenemist. … Saate rakke säilitada, kuni morfoloogia on hea (see sõltub teie rakutüübist, mõned rakud võivad ulatuda kuni 80 läbipääsuni ja mõned kuni 10 läbipääsu).
