Restriktsiooniga seedimise produkti saab kergesti säilitada -20 C juures. 4 C juures oleks hea, kuid tagamaks, et aktiivsust ja tähtede tegevust ei toimu soovitatav hoida temperatuuril -20 C.
Kuidas te seeditud DNA-d salvestate?
Proovige säilitada geeliviilu üleöö külmikus või isegi sulatada viil puhvris ja külmutada -20°C või -80°C juures. DNA lagunemine toimub sama kiirusega ja samades tingimustes kui lahustuv DNA, seega kasutage pikemaks säilitamiseks külmemat temperatuuri.
Mida tähendab plasmiidi seedimine?
Puhastatud plasmiidne DNA lagundatakse ühe või enama restriktsiooniensüümiga (RE), mis on valitud nii, et saadakse selge DNA ribamuster, mida on lihtne elektroforeesiga lahutada. … Tavaliselt valitakse restriktsiooniensüümid, mis lõikavad läbi mitme kloonimissaidi (MCS) ja annavad 2–5 hõlpsasti eraldatava ribaga diagnostilise mustri.
Kuidas te lineariseeritud plasmiide salvestate?
Kui olete mures TE allavoolu mõjude pärast, säilitage DNA-d kõrgemas kontsentratsioonis ja lahjendage vajadusel või kasutage "madalat TE-d", mis on 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. kui DNA või RNA on puhas, saab seda säilitada -20 °C juures mitu kuud ilma lagunemiseta.
Kui kaua saate piiranguid säilitada?
Pro-Tip Olenev alt rakendusest ja DNA kogusest reaktsioonis võib inkubatsiooniaeg ulatuda 45 minutist kuni üleöö. Diagnostiliste kokkuvõtete jaoks piisab sageli 1–2 tunnist. Kloonimisel kasutatud >1 µg DNA-ga lõikude puhul on soovitatav seedida vähem alt 4 tundi.
