Viimastel aastatel kasutas Coriell oma rakukultuurides kogu kuumusega inaktiveeritud seerumit, et inaktiveerida vastsündinu vasika seerumis leiduvat komplemendi valku. Kuna oleme üle läinud veise loote seerumile, leiame, et kuumuse inaktiveerimine on pole vajalik enamiku rakuliinide puhul.
Kui kaua te kütmisega FBS-i inaktiveerite?
Veise loote seerumi (FBS) kuuminaktiveerimiseks on soovitatav järgmine protokoll. FBS-i kuumutatakse 56±2 °C-ni 30±2 minutiks segatavas veevannis. Kuumuse inaktiveerimine (HI) – protsess, mille käigus FBS-i hoitakse temperatuuril 56±2° 30±2 minutit.
Miks on FBS-i jaoks enne kasutamist vajalik kuumuse inaktiveerimine?
FBS-i tavaline ravi on kuuminaktiveerimine, mille käigus FBS-i kuumutatakse 56 °C juures 30 minutit veevannis, aeg-aj alt loksutades. Eesmärk on inaktiveerida kõik FBS-is esinevad komplemendisüsteemi komponendid [24] ja muud potentsiaalsed tundmatud rakukasvu inhibiitorid.
Miks on vaja seerumit kuumusega inaktiveerida?
Kuumainaktiveerimise eesmärk on hävitada komplemendi aktiivsus seerumis, ilma et see mõjutaks toote kasvu soodustavaid omadusi. Komplemendi aktiivsuse eemaldamine seerumist ei ole enamiku rakukultuuride puhul vajalik, kuid see võib olla vajalik kultuuride puhul, mis on komplemendi aktiivsuse suhtes tundlikud.
Kuidas salvestate soojuse inaktiveeritud FBS-i?
Kaitske ülessulanud FBS-i ja muid seerumeid ohutu jahutamise jaladustamine. Kasutage sulatatud seerumit kohe. Vedelat FBS-i ja muud seerumit võib hoida külmkapis (2–8 °C) kuni neli nädalat.
